產(chǎn)品介紹

基 因 型F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm rne131 (DE3)簡 要 說 明High5TM系列BL21 Star(DE3)感受態(tài)細胞來源于BL21(DE3)菌株，含有rne131基因突變體，rne131突變基因能夠增強菌株細胞內(nèi)mRNA的穩(wěn)定性，從而提高蛋白表達能力。主要適用于T7啟動子表達載體(如pET系列)的高水平蛋白表達。High5TM系列BL21 Star(DE3)感受態(tài)細胞由特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率達108cfu/μg。操 作 說 明1.取100μl冰上融化的BL21 Star(DE3)感受態(tài)細胞，加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。2.42℃水浴熱激90秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(2YT或LB)，混勻后37℃，200rpm復蘇60分鐘。4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。注 意 事 項1.感受態(tài)細胞最好在冰上融化。插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。2.混入質(zhì)粒時應(yīng)輕柔操作。3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。4.誘導時，IPTG濃度可選（0.1-2mM均可）。5.為獲得需要量的蛋白，最佳誘導時間、溫度以及IPTG濃度需實驗者優(yōu)化。

此產(chǎn)品需要干冰運輸發(fā)貨，會根據(jù)路途及包裝大小收取一定的干冰運費。